液质联用方法检测山环素中有关物质及其分子量

山环素化学式C21H22N2O7，又称去甲去氧四环素，由于是合成米诺环素的重要中间体，所以也称为米诺环素杂质B，作为四环素类抗生素的一种重要的半合成中间体原料，其性质的不稳定会在制药过程带来副产物，或是在生产和贮藏发生4位碳上二甲胺的差向异构，导致严重影响药物质量。微源实验室查阅文献资料，实验了一种山环素检测方法。

量取适量的山环素样品，用乙腈:水=1:9稀释得到1mg/ml溶液，过程中适量滴加HCl溶解，得到山环素待测溶液。将色谱和质谱条件调整如下，得到HPLC-MS（+）谱图

色谱柱

HypersilODS2，5μm，4.6*250mm

流动相

乙腈:0.01mol/LNH4AC（V:V=15:85）

柱温

40℃

流速

1.0ml/min

紫外检测波长

280nm

目标质荷比

400m/z

质荷比扫描范围

50-1000m/z

扫描极性

(+)

干燥气流

6.0L/min

干燥温度

350℃

可以看到样品在液质方法下峰有拖尾现象，但主要物质可以看到基本的分离，Rt=22.2min的主峰是山环素，分析其余各色谱峰的质谱信息，Rt=12.7min对应分子量为464，推测为与山环素结构相似的地美环素，推测Rt=13.9min的峰是山环素4位碳上二甲胺的差向异构体。Rt=8.6min没有相应的杂质可供参考。

参考该质谱联用的分析方法可以使得山环素与各相关物质得到有效分离，离子流色谱图准确获得各组分分子量，但分子结构的确认上存在一定的局限，具体的结构确证还需要进一步核磁等解析来进行确定。LC-MC液质联用法简便、灵敏、操作性好，可用于定性定量分析各有关物质，为接下来制药环节的量监控及其合成工艺的优化提供保证。

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